二甲双胍对HaCaT细胞增殖及miR-21-5p和PDCD4表达的影响

摘要：

目的 探讨二甲双胍对角质形成细胞增殖的影响及其可能的作用机制.方法 以HaCaT细胞为研究对象,分别给予不同浓度二甲双胍(25、50、75、100 mmol/L)刺激24 h,CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性;实时定量PCR法检测HaCaT细胞中miR-21-5p及其下游靶基因PDCD4 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测HaCaT细胞中PDCD4蛋白表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 二甲双胍可抑制HaCaT细胞增殖,25、50、75、100 mmol/L二甲双胍作用于HaCaT细胞24 h后,细胞抑制率分别为5.43％±3.67％、19.61％±6.95％、45.93％±9.56％、61.91％±6.93％,各组细胞抑制率差异有统计学意义(F=246.90,P＜0.05);25 mmol/L组与对照组(0.00％±3.00％)相比,差异无统计学意义,其余各组抑制率均较对照组显著增高(P＜0.05);实验组不同浓度组间比较,差异也均有统计学意义(P＜0.05).25、50、75、100 mmol/L二甲双胍实验组miR-21-5p mRNA相对表达量(2-△△Ct)分别为0.90±0.11、0.33±0.05、0.21±0.07、0.14±0.04,PDCD4mRNA相对表达量(2-△△Ct)分别为2.11±0.64、7.22±1.13、11.16±1.23、19.12±3.16,各组细胞miR-21-5p mRNA和PDCD4 mRNA的表达差异均有统计学意义(F值分别为36.99和96.26,均P＜0.05);25 mmol/L组与对照组相比,差异无统计学意义,其余各组miR-21-5p及PDCD4 mRNA的表达均较对照组显著下调或上调(均P＜0.05);实验组不同浓度组间比较,差异也均有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,25、50、75、100 mmol/L二甲双胍实验组PDCD4蛋白表达明显升高,其相对表达量分别为1.22±0.08、2.09±0.20、2.26±0.11、2.37±0.07,组间表达差异有统计学意义(F=75.37,P＜ 0.05).25 mmol/L组与对照组相比差异无统计学意义,其余各组均较对照组明显升高(P＜0.01).结论 二甲双胍在体外能够显著抑制HaCaT细胞的增殖,可能通过下调miR-21-5p的表达,使其下游靶基因PDCD4表达上调,从而发挥抑制细胞增殖的作用.

关键词：角蛋白细胞、二甲双胍、银屑病、细胞增殖、miR-21-5p、PDCD4、HaCaT细胞

所属期刊栏目：48

分类号：R737.33;R329.26;S828.91

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;山东省自然科学基金

在线出版日期：2015-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：200-203