2-甲氧基雌二醇对恶性黑素瘤B16细胞株增殖与凋亡的影响

摘要：

目的 探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME)对小鼠恶性黑素瘤B16细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法 选用小鼠B16细胞进行体外培养,实验分为阴性对照组和药物处理组,药物处理组加入2-ME,使其终浓度分别为5、10、20、40 μmol/L,阴性对照组不加2-ME.作用不同时间后,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;根据磺酰罗丹明B方法测得的各组A490值绘制生长曲线;采用磺酰罗丹明B法检测黑素瘤细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;逆转录PCR和实时PCR法分析凋亡诱导基因(gadd45b)及原癌基因(c-myc)的表达情况.结果 重复测量的方差分析显示,5、10、20、40 μmol/L的2-ME作用于黑素瘤细胞不同时间后对其增殖的抑制作用差异有统计学意义(F=1170.94,P＜ 0.01);上述浓度的2-ME作用24、48、72 h对黑素瘤细胞增殖的抑制作用差异亦有统计学意义(F=1843.04,P＜ 0.01);药物浓度和培养时间存在交互作用(F=272.79,P＜ 0.01).10、20、40μmol/L 2-ME作用48 h后,B16细胞的凋亡率分别上升至(4.13±1.12)％、(11.25±2.38)％、(19.46±2.9)％,与阴性对照组[(0.23±0.5)％]相比,差异均有统计学意义(P＜0.01);细胞出现G0/G1期阻滞,对照组细胞、10、20、40 μmol/L 2-ME处理组细胞G0/G1期比例分别为(44.1±3.4)％、(59.5±5.6)％、(63.4±8.2)％、(70.8±4.4)％,且随着浓度的增加,G0/G1期细胞明显增加,各处理组及对照组间比较,G0/G1期细胞比例差异有统计学意义(F=13.56,P＜ 0.05).与阴性对照组相比,20 μmol/L和40 μmol/L 2-ME作用24 h可升高gadd45b的表达(均P＜ 0.01),10、20、40μmol/L 2-ME均可降低c-myc基因的表达,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 2-ME在体外能够抑制小鼠恶性黑素瘤B16细胞的增殖,能够使c-myc基因的表达降低,使gadd45b基因的表达升高.

关键词：雌二醇、黑色素瘤、实验性、细胞系、肿瘤、细胞增殖、细胞凋亡、基因、myc、Gadd45基因

所属期刊栏目：48

分类号：R739.5;R285.5;R963

资助基金：河北省卫生厅医学科学研究项目20130252

在线出版日期：2015-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：166-170