芹菜素抑制人恶性黑素瘤细胞株增殖及侵袭的研究

摘要：

目的 研究芹菜素对恶性黑素瘤体外抑制作用及其分子机制.方法 将人恶性黑素瘤细胞株A375和C8161分为实验组和对照组,实验组经不同浓度芹菜素处理一定时间,对照组采用二甲基亚砜处理.采用噻唑蓝(MTT)法检测A375和C8161细胞的增殖,划痕法检测细胞迁移.Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭性,扫描电镜观察细胞树突形态,膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin-V/PI)法检测细胞凋亡,PI单染法检测细胞周期,Western印迹检测细胞凋亡及细胞外信号调节激酶通路相关蛋白的表达.结果 MTT显示,芹菜素在10 ～ 40 mg/L浓度范围内对A375和C8161细胞抑制作用呈量效关系,在0～48h呈时效关系,与对照组相比差异有统计学意义(均P＜ 0.05);24 h的半数抑制率(IC50)均为25 mg/L.体外迁移试验证实,10、20、25 mg/L芹菜素作用于A375和C8161细胞24h后可明显抑制细胞迁移(P＜0.01).体外侵袭实验证实,10、20、25mg/L芹菜素作用于A375和C8161细胞72 h,细胞侵袭数量显著少于对照组(P＜0.01).扫描电镜示,经25 mg/L芹菜素作用24 h后,A375和C8161细胞树突均变细长,A375细胞树突长度为(23.30±2.62) μm,与对照组(12.38±2.27) μm相比差异有统计学意义(P＜0.01);C8161细胞树突长度为(16.50±1.62)μm,与对照组(9.36±2.51)μm相比差异亦有统计学意义(P＜0.01).10、25 mg/L芹菜素处理24 h后,A375细胞凋亡率分别为(3.30±0.82)％、(10.00±0.60)％,与对照组[(0.40±0.07)％、(4.00±0.70)％]相比差异有统计学意义(均P＜0.01);C8161细胞凋亡率分别为(13.10±1.45)％、(25.77±2.40)％,与对照组(7.27±1.31)％相比差异亦有统计学意义(均P＜ 0.01).25 mg/L芹菜素作用于A375和C8161细胞24 h后,细胞周期阻滞于G2/M期,其比例分别为(48.70±3.04)％、(31.10±1.90)％,与对照组[(21.30±0.75)％、(25.06±2.12)％]相比差异有统计学意义(均P＜ 0.01).经25 mg/L芹菜素作用24 h后,A375和C8161细胞凋亡相关蛋白活化型半胱天冬酶3(Cleaved caspase-3)和多聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶裂解片段(Cleaved PARP)表达均增加,细胞外信号调节激酶通路均被活化.结论 芹菜素可抑制人恶性黑素瘤细胞增殖、迁移、侵袭,诱导细胞凋亡及周期阻滞,其机制可能与调节ERK信号通路相关蛋白的表达有关.

关键词：芹菜素、黑色素瘤、实验性、细胞增殖、细胞运动、细胞外信号调节MAP激酶类

所属期刊栏目：48

分类号：R735.3;R587.202;R655.8

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;辽宁省自然科学基金

在线出版日期：2015-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：120-124