RNA干扰p53基因对中波紫外线诱导的早衰和光致癌相关基因表达的影响

摘要：

目的 探讨RNA干扰p53基因对中波紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)早衰和光致癌相关基因表达的影响.方法 利用已构建成功的RNA干扰抑制p53表达的HSF细胞系,加以反复多次亚毒性剂量UVB照射,衰老相关的β半乳糖苷酶(SA β-gal)染色法检测细胞衰老,定制实时定量PCR芯片,检测多种光致癌发生相关基因的表达,包括:参与细胞衰老通路的p53、p21、p19、p16、pRb,衰老相关基因纤维结合素(FN)、骨结合素(ON)、平滑肌22(SM22),p53依赖的细胞凋亡相关基因bax和bcl-2,UVB诱导的癌基因缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)以及负性调控p53的人双微球蛋白2基因(hdm2).使用SPSS10.0软件对各组间数据进行配对t检验.结果 抑制p53表达的HSF经UVB照射后SA β-gal活性(19.70％±0.85％)较照射前(12.77％±0.81％)有所增加(t=6.45,P＜0.05),但显著低于正常HSF经UVB照射后(50.48％±5.30％,t=7.86,P＜ 0.05),与正常HSF组(18.50％±0.45％)差异无统计学意义(t=2.57,P＞0.05).基因检测结果表明,抑制p53表达可抑制衰老基因p21、p19、FN、ON、SM22等的表达,但p16通路并不受之影响,在UVB作用下,p16、pRb的表达显著增加,分别上调.抑制p53的表达可使抑凋亡基因bcl-2上调及促凋亡基因bax下调,癌基因HIF-1α、VEGF、hdm2表达明显增加.UVB照射对这些基因表达改变无明显影响.结论 抑制p53表达能够延缓UVB诱导的早衰.UVB诱导的早衰具有p53依赖的相关肿瘤抑制作用.

关键词：基因、p53、RNA干扰、衰老、过早、紫外线、成纤维细胞

所属期刊栏目：47

分类号：R758.14;R285.5;R573

资助基金：国家自然科学基金;江苏省自然科学基金;南京市卫生局青年科技人才启动基金

在线出版日期：2014-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：259-262