体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为黑素细胞的观察

摘要：

目的 探讨骨髓间充质干细胞体外诱导成为黑素细胞的可能性.方法 6周龄雄性C57BL/6小鼠股骨基质细胞行原代培养,6次传代后以氢化可的松、重组人胰岛素、转铁蛋白和成纤维细胞生长因子诱导黑素细胞.倒置光学显微镜观察细胞分化;透射电镜观察黑素小体成熟;免疫荧光染色观察黑素细胞相关表位表达;流式细胞仪检测黑素细胞的细胞周期及获得率.结果 6次传代间充质干细胞数量近109,免疫荧光检测CD44阳性率94.3％和CD105阳性率82.3％.培养180 d,细胞形态接近于黑素细胞,树突增多,胞质内出现黑素小体样结构,生长周期加快为3～4 d,肉眼可见棕黑色细胞沉淀.电镜观察显示Ⅳ期为主的黑素小体.免疫荧光显示酪氨酸酶相关蛋白-1,酪氨酸酶相关蛋白-2和小眼畸形相关转录因子阳性.流式细胞仪分析显示细胞基本处于G1和S期.酪氨酸酶相关蛋白-1阳性的黑素细胞获得率约为80％.结论 骨髓间充质干细胞可以被大量诱导分化为黑素细胞;诱导黑素细胞的形态学、超微结构、特异性表位等皆接近于正常黑素细胞,具有一定的增殖活性,获得率较高.

关键词：间质干细胞、骨髓、黑素细胞、体外研究

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资助基金：上海市科委重点攻关项目11DZ1973000;上海市卫生局项目2010J006A

在线出版日期：2013-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：336-340