系统性硬化病患者外周血CD4+T细胞CD40L DNA甲基化研究

摘要：

[目的]探讨系统性硬化病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD40L基因调控序列的甲基化状态.[方法]密度梯度离心法分离SSc患者(女16例,男10例)和健康对照组(女15例,男10例)外周血单一核细胞,磁珠分选CD4+T细胞,提取DNA,亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR扩增CD40L基因调控序列片段(包括启动子和增强子),转化进入大肠杆菌,每个样本挑取8个克隆进行测序.[结果]亚硫酸盐基因组测序结果显示,健康女性CD40L基因调控序列一半为甲基化,一半为去甲基化,女性SSc患者CD40L基因启动子和增强子区域平均甲基化水平均显著低于女性健康对照(P值均＜ 0.01)；男性SSc患者和男性健康对照CD40L基因启动子和增强子区域几乎全部为去甲基化,两组平均甲基化水平差异无统计学意义(P值均＞0.05).[结论]女性SSc患者CD4+T细胞中失活的X染色体上CD40L调控序列低甲基化,可能是导致CD40L在女性SSc患者CD4+T细胞中过度表达的原因之一.

机标关键词：系统性硬化病、患者、外周血单一核细胞、甲基化水平、启动子和增强子、调控序列、peripheral blood、基因启动子、女性、regulatory elements、mononuclear cells、去甲基化、健康、sodium bisulfite、density gradient、密度梯度离心法、magnetic beads、子区域、X chromosome、venous blood

所属期刊栏目：45

分类号：R816.95(放射医学)

资助基金：国家自然科学基金30972662;科技部国际科技合作重点项目2008DFA31980

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：517-519