梅毒螺旋体重组蛋白Tp0136的表达、纯化及免疫活性分析

摘要：

目的 克隆并表达梅毒螺旋体Tp0136基因,对其表达产物进行纯化以及免疫活性分析.方法 全基因合成Tp0136基因,构建E,coli表达载体；诱导表达并纯化重组蛋白,用SDS-PAGE和Western 印迹鉴定.用纯化的重组蛋白Tp0136免疫新西兰兔,并以重组Tp0136作为包被抗原建立间接酶联免疫吸附试验( ELISA)以鉴定其免疫原性,Western印迹检测梅毒阳性血清鉴定其免疫反应性.结果 成功构建E.coli表达载体pET28a-Tp0136,并表达和纯化出膜蛋白Tp0136,相对分子质量为50 000,纯度＞95％.用重组蛋白Tp0136免疫新西兰兔,能刺激其产生高滴度抗体,具有较强的免疫原性.Western印迹显示其能与梅毒阳性血清发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.结论 成功表达具有Tp0136全基因和较强免疫活性的膜蛋白,Tp0136可能在梅毒螺旋体的免疫致病机制中起到重要作用.

关键词：密螺旋体、苍白、Tp0136、基因表达、膜蛋白质类、免疫活性

所属期刊栏目：45

分类号：R816.95(放射医学)

资助基金：江苏省自然科学基金面上项目BK2010136

在线出版日期：2012-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：396-399