大疱性类天疱疮和妊娠疱疹患者血清抗BP180NC16A抗体的纯化和鉴定

摘要：

目的 探讨大疱性类天疱疮(BP)和妊娠疱疹(HG)患者血清抗BP180 NC16A抗体的纯化和鉴定方法.方法 原核表达系统pGEX-2TBP180NC16A表达GST/NC16A融合蛋白,将融合蛋白与谷胱甘肽琼脂糖凝聚微珠进行共价偶联.微珠亲和层析法纯化BP和HG患者血清中抗BP180 NC16A抗体,并用ELISA、免疫荧光、及Western印迹进行鉴定.结果 原核表达系统pGEX-2TBP180NC16A表达37 000GST/NC16A融合蛋白,微珠亲和层析法纯化后得单一抗BP180 NC16A抗体.经ELISA方法定量后确定其含量为2.4 mg/ml；该抗体能与人皮肤基底膜带结合,证明抗体活性；免疫印迹可见单一片段,显示抗体纯度.结论 微珠亲和层析法纯化的BP和HG患者血清中抗BP180 NC16A自身抗体活性高、特异性强.

关键词：类天疱疮、大疱性、妊娠期类天疱疮、BP180 NC16A

所属期刊栏目：45

分类号：R758.66(皮肤病学与性病学)

资助基金：国家自然科学基金81071301;教育部新世纪人才项目NCET-10-0964

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：9-11