稳定表达人乳头瘤病毒16E7蛋白HaCaT细胞株的建立

摘要：

目的建立稳定表达人乳头瘤病毒(HPV)16E7蛋白的HaCaT细胞株.方法利用PCR及酶切技术扩增出CaSki细胞中HPV16E7基因并定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HPV16E7.将重组质粒转染入HaCaT细胞,经G418筛选稳定表达HPV16E7蛋白的细胞株并予以鉴定.结果经酶切、测序鉴定构建pcDNA3.1(+)-HPV16E7成功.RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后检测到HPV16E7mRNA表达的特异性297 bp条带;Western印迹可检测到E7蛋白稳定表达.结论成功构建出稳定表达HPV16E7蛋白的HaCaT细胞株.

关键词：人乳头瘤病毒16、HaCaT细胞、转染

所属期刊栏目：44

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30972665;上海市自然科学基金08ZR1417400;上海市级医院临床科研资源共享平台项目SHDC12007703

在线出版日期：2011-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：310-313