磷酸化NF-κB亚基P65介导化学性缺氧诱导的HaCaT细胞炎症损伤

摘要：

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)亚基P65磷酸化是否参与化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)诱导的永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)毒性作用及炎症反应.方法 用2 mmol/L CoCl2处理HaCaT细胞,建立化学性缺氧诱导HaCaT细胞损伤的体外模型.RNA干扰法下调NF-κB亚基P65的表达.细胞计数试剂盒-8比色法检测细胞存活率;ELISA法检测培养基中IL-6和IL-8的含量;Western印迹法检测总量P65及磷酸化P65的蛋白表达.结果 CoCl2处理HaCaT细胞0～4 h,可促进NF-κB亚基P65的磷酸化,在0.5 h时P65亚基开始磷酸化,1.5 h时P65亚基的磷酸化水平达到高峰,约为对照组的6.6倍,而4 h基本恢复到正常水平.CoCl2处理HaCaT细胞0～6 h,可时间依赖性地降低细胞活力,2、4和6 h的细胞存活率与对照组比较,P值分别＜0.05、＜0.01及＜0.01.CoCl2处理6 h,还引起IL-6和IL-8的释放显著增加.RNA干扰法下调P65的表达后,CoCl2处理引起的HaCaT细胞毒性作用被明显减弱,即使细胞存活率升高了11%左右,下调P65表达还明显抑制了CoCl2处理引起的IL-6和Il-8释放增多.结论 磷酸化NF-κB亚基P65介导CoCl2诱导的HaCaT细胞毒性及炎症反应.

关键词：细胞低氧、角蛋白细胞、炎症、NF-κB

所属期刊栏目：44

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

资助基金：广东省科技计划项目2010B080701035;2008B080703053

在线出版日期：2011-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：195-198