10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2011.01.016
用酵母双杂交技术筛选与HSPC016相互作用的蛋白
目的 采用酵母双杂交技术筛选毛乳头细胞中与造血干细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPC)分化相关基因HSPC016相互作用的蛋白,了解其参与调控毛乳头细胞凝集性生长的分子机制.方法 应用酵母双杂交系统,将构建的pGBKT7-HSPC016诱饵质粒与含原代人毛乳头细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,筛选与HSPC016相互作用的蛋白,通过回复性杂交试验验证其可靠性,并对阳性克隆进行测序和生物信息学分析.结果 筛选出4个与HSPC016有相互作用的蛋白,包括转录因子叉头框蛋白O1(forkhead box O1,FOXO1)、丝裂原活化蛋白激酶11、磷酸次黄苷酸激酶3调节亚单位3(PIK3R3)、肝X受体,它们均与细胞内能量代谢、转录调节相关.结论 HSPC016可能通过参与细胞内活性氧水平调节,并与细胞内参与能量和转录调节的相关信号分子相互作用,调节毛乳头细胞的凝集性生长状态.
毛乳头细胞、HSPC016、双杂交系统技术、细胞集合
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R75(皮肤病学与性病学)
国家自然科学基金30671887
2011-02-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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