InnVit基因对B10BR细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

摘要：

目的 分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株B10BR细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响.方法 化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF-P120,lipofectamine~(TM) 2000脂质体方法转染BIOBR细胞.半定量RT-PCR法检测InnVit基因mRNA水平;Western印迹检测该蛋白水平变化;MTT法测定细胞增殖情况;流式细胞技术分析细胞周期和凋亡的变化.结果 InnVit基因抑制后mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,InnVit基因过表达质粒组mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组;转染后24、48、72 h抑制组的细胞存活量极显著下降(P＜0.01),过表达质粒组的细胞存活量在48和72 h极显著增加(P＜0.01).转染后48 h基因抑制组的早期凋亡率从(10.24±1.00)%升至(37.34±3.26)%,过表达质粒组早期凋亡率从(14.58±1.49)%降至(8.43±0.86)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);转染48 h基因抑制组的G_1期细胞由(56.11±5.46)%增至(69.76.±6.08)%(P＜0.05),过表达质粒组的G_1期细胞由(55.14±5.65)%降至(29.33±3.01)%(P＜0.01).结论 InnVit基因抑制使细胞增殖能力下降,促进细胞凋亡;InnVit基因的过表达增强了细胞的增殖能力,抑制细胞凋亡.其增殖能力的改变可能是通过细胞周期的调控调节的.

关键词：InnVit基因、白癜风、细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞、培养的

所属期刊栏目：43

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

资助基金：国家自然科学基金30671896;30872280;浙江省自然科学基会Z206607

在线出版日期：2010-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：269-272