阴道念珠菌病患者阴道分泌物总RNA提取方法的研究

摘要：

目的 探索一种简单有效的人体阴道分泌物标本总RNA提取方法并验证其可行性.方法 采用人体上皮细胞与念珠菌标准菌株的混合物(106:106),对匀浆、玻璃珠和液氮研磨三种破壁方法,纯化柱、酚两种提取方法组合产生的5种不同RNA提取方法进行比较.并将提取效果最好的方法应用于临床标本.结果 5种方法均可提取出总RNA,其中,热酚法提取质量浓度最高,达到0.6546 g/L,其次为RNeaay试剂盒提取方法为0.6010 g/L,玻璃珠法为0.2678 g/L,匀浆后TRIzol法为0.2284 g/L,液氮研磨后TRIzol法为0.21 15 g/L.但电泳结果显示,以液氮研磨后TRIzol提取质量最好,而且标准菌株及培养细胞混合物两种细胞成分RNA均被提取,RT-PCR以及荧光定量PCR验证结果显示,该方法可以应用于临床标本RNA提取.结论 液氮研磨后TRIzol法是一种简单而有效的阴道分泌物临床标本RNA提取方法,而且提取物可以满足常规下游实验的需求.

关键词：念珠菌病、外阴阴道、黏液、RNA提取

所属期刊栏目：41

分类号：R711.31;R285.5;R363.2

资助基金：国家自然科学基金30571676

在线出版日期：2008-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：531-534