人乳头瘤病毒16 E6/7转基因小鼠模型的建立

摘要：

目的 构建pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,通过显微注射法建立HPV16 E6/7转基因小鼠模型.方法 应用基因重组技术,构建pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,将经线性化的包含启动子、目的基因、PolyA尾的完整的真核表达DNA,通过将外源基因显微注射到供体小鼠受精卵的雄原核中,再植入到假孕受体鼠的输卵管中,获得129只F0代小鼠,常规法提取这些转基因小鼠的基因组DNA,进行PCR分析,得到5只原代转基因小鼠,再进行DNA印迹分析,其中4只小鼠的DNA出现与阳性质粒对照类似的特异条带,说明E6/7整合在这4只小鼠的基因组中.将Founder小鼠与正常FVB配种,后代经PCR检测,统计结果符合孟德尔遗传定律,证明外源基因稳定遗传给后代.在4只5月龄F0代阳性转基因小鼠中有2只小鼠耳朵皮肤出现不典型增生改变.结果 成功构建了pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,用包含CMV启动子、HPV16 E6/7目的基因转基因的小鼠已出现皮肤组织不典型增生.结论 获得可繁殖传代的整合了HPV16 E6/7基因的转基因小鼠模型.

关键词：乳头状瘤病毒、人、小鼠、转基因、微量注射、模型、动物

所属期刊栏目：40

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：江苏省自然科学基金BK2004057;江苏省重点学科建设项目135-3

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：286-288