反向斑点杂交技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体及基因分型

摘要：

目的建立反向斑点杂交技术,对泌尿生殖道沙眼衣原体感染进行检测和基因分型.方法用0ligo软件设计寡核苷酸探针,采用巢式聚合酶链反应(PCR)扩增ompl基因的VS1-VS2序列,反向斑点杂交技术对沙眼衣原体进行检测和基因分型.结果巢式PCR扩增ompl基因的VS1-VS2序列的敏感性与质粒PCR符合率为98.2%(56/57).优选出11条型特异性(A、B+Ba、C、D、E、F、G、H、I、J和K)和3条群特异性寡核苷酸探针:B群(B、Ba、D和E型),C群(A、C、H、I、J和K型)和中间群(F和G型).特异性经过基因库中的BLAST程序比较和试验优化,结果显示各探针均与标准株呈特异性杂交.56例VS1-VS2 PCR阳性的临床标本杂交法检测均阳性,共检出59株沙眼衣原体,包括8个基因型,其中以E、F、D和H型为主,占77.9%,分别为25.4%,22.0%,16.9%和13.6%.发现3例混合感染占5.4%,分别为D/E、D/F和F/K.结论反向斑点杂交技术简便且快速,可直接对临床标本沙眼衣原体进行检测和基因分型.

关键词：衣原体、沙眼、基因型、寡核苷酸探针

所属期刊栏目：39

分类号：R77(眼科学)

资助基金：广东省科技厅科研项目2005B34201011;广东省卫生厅科研项目A2005150

在线出版日期：2006-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：272-274