In-cell PCR技术扩增白癜风自身抗体基因

摘要：

目的从白癜风患者外周血B淋巴细胞中扩增获得原始亲本配对的抗体基因.方法以正常人的黑素细胞为抗原,用活细胞ELISA法筛选50例白癜风血清,选择其中7例抗黑素细胞膜抗体强阳性的患者外周血分离得到CD19+B淋巴细胞,以10%甲醛溶液固定,蛋白酶K溶液通透化处理,进行in-cell PCR.用特异性引物进行in-cell RT-PCR扩增人免疫球蛋白轻链和重链可变区基因,采用Cre/loxP系统在细胞内完成轻重链的连接,然后经巢式PCR扩增获得具有细胞内原始亲本配对特性的单链抗体基因.结果经in-cell PCR扩增,获得了与预期单链抗体大小一致的单一800 bp产物.结论利用in-cell PCR技术可以扩增白癜风原始亲本配对的自身抗体基因.

关键词：白癜风、聚合酶链反应、自身抗体

所属期刊栏目：39

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

资助基金：中国科学院资助项目30300307

在线出版日期：2006-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：38-40