人乳头瘤病毒11型E7蛋白基因重组腺病毒载体的构建及表达

摘要：

目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7蛋白基因腺病毒载体,并在真核细胞表达.方法用PCR法,扩增出HPV11E7基因,定向克隆至pENTR-TOPO载体形成重组质粒TOPO-E7.TOPO-E7与腺病毒载体pAD/CMV/V5-DESTTM重组反应,E7基因被重组到腺病毒载体上.该载体经PacI酶切,脂质体法转染人胚肾293A细胞,获得重组腺病毒载体pAD-E7.pAD-E7转染人HaCaT细胞,激光共聚焦显微镜分析E7蛋白表达情况.结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒TOPO-E7成功构建.重组子一D-E7转染293A细胞后,获得滴度为1.4×107 pfu/mL的重组腺病毒载体.该载体转染HaCaT细胞,48 h后激光共聚焦显微镜下可见细胞内E7蛋白表达.结论重组腺病毒载体能有效介导HPV11E7基因在真核细胞的表达.

关键词：尖锐湿疣、乳头状瘤病毒、人、基因病毒、遗传载体、基因表达

所属期刊栏目：38

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

资助基金：江苏省重点学科建设项目135-3

在线出版日期：2005-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：276-278