10.3760/j.issn:0412-4030.2005.02.014
DNA芯片检测泌尿生殖道病原体及耐药的研究
目的研制一种DNA芯片,结合多重PCR方法快速检测泌尿生殖道炎症3种病原体及其耐药类型.方法根据泌尿生殖道病原体淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体的基因保守序列设计引物和探针,分别检测3种病原体;根据淋球菌gyrA、parC和16S rRNA基因序列突变位点设计引物和探针,分别检测淋球菌对喹诺酮类药物和大观霉素的耐药性;根据淋球菌和解脲脲原体的共同tetM基因序列设计引物和探针,检测对四环素的耐药性.制备芯片,对152份泌尿生殖道拭子提取DNA进行7重PCR扩增,并且Cy5荧光标记包含上述基因序列的目的DNA片段,与固定在芯片上的探针杂交,芯片信号分析系统Scanarrav 4000在635 nm处扫描并分析结果,并与临床检查结果比较.结果 DNA芯片敏感性是0.01fg质粒DNA.152份泌尿生殖道炎症拭子其病原体种类及其耐药类型全部可用DNA芯片检测出来,与目前临床检查结果有较好的一致性(K>0.8).结论研制的DNA芯片结合7重PCR方法快速检测泌尿生殖道淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体3种病原体及其对喹诺酮类药物、大观霉素和四环素的耐药类型,具有快速、高特异性和高灵敏度,可以应用于临床检测.
奈瑟球菌、淋病、衣原体、沙眼、尿素支原体、尿素分解、寡核苷酸序列分析、微生物敏感性试验
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S85;TP3
2005-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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