10.3760/j.issn:0412-4030.2004.07.013
人乳头瘤病毒11型E7蛋白基因的克隆和表达
目的从尖锐湿疣皮损标本中扩增出人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定.方法用PCR法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV11 E7蛋白基因,与pGEX-6P-1载体连接成重组表达质粒pGEX-6P-1/E7;重组质粒转入BL21大肠杆菌,经诱导表达融合蛋白GST-E7;该蛋白经剪刀酶切除GST,Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测鉴定.结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pGEX-6P-1/E7成功构建,诱导后高表达GST-E7融合蛋白并得到纯化,蛋白质印迹证实表达蛋白为E7蛋白.结论获得高表达、高纯度的HPV11E7蛋白,为该蛋白的功能及免疫学分析及尖锐湿疣疫苗研究打下了基础.
尖锐湿疣、乳头状瘤病毒、人、E7基因、质粒
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R37;R73
江苏省重点学科建设项目135-3
2004-08-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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