10.3760/j.issn:0412-4030.2004.01.013
抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体对噬菌体随机12肽库的免疫筛选
目的从噬菌体随机多肽库中筛选出能与肿瘤坏死因子--α特异性结合的短肽分子.方法采用肿瘤坏死因子-α作为配基,免疫亲和筛选以融合蛋白形式在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ表达的随机12肽文库,按"吸附-洗脱-扩增"的淘洗过程,经过3轮免疫筛选后,随机挑取噬菌体克隆用双抗体夹心ELISA及斑点ELISA测其特异性,并用混合的阳性噬菌体克隆分别与SLE患者和正常人血清反应,以斑点ELISA法分析其诊断系统性红斑狼疮的价值.结果经过3轮免疫筛选,特异性结合的阳性噬菌体克隆富集增加近100倍,第3轮筛选后随机挑选7个阳性噬菌体克隆,经双抗体夹心ELISA和斑点ELISA检测,有5个克隆能与肿瘤坏死因子α特异性相结合,其中A值最高的5个克隆混合后与SLE患者血清结合率明显高于正常人,差异有显著性.结论噬菌体随机肽库技术可以应用于分析、鉴定肿瘤坏死因子α的表位,继而为获得亚单位表位水平的诊断试剂和抗肿瘤坏死因子α的短肽疫苗提供依据.
肿瘤坏死因子、肽库、细菌噬菌体M13
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R73(肿瘤学)
湖南省自然科学基金01JJY2015
2004-05-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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