10.3760/j.issn:0412-4030.2001.05.019
聚合酶链反应快速检测念珠菌属
@@病原真菌因具有特殊的细胞壁结构,故聚合酶链反应 (PCR)检测方法自建立以来一直需要经过反复的真菌破壁和 DNA抽提过程才能获取提纯的 DNA,以进行下一步的 PCR检测 [1- 3]。近来有学者已使用基因释放剂、 CTAB及异硫氰酸胍等 [4- 6]对真菌菌株或临床标本进行前期处理,然后进行 PCR检测,但这仍需要配制复杂的原生质体形成缓冲液、原生质体裂解缓冲液 [6]等,或者高额购买商品化的基因释放剂 [4,5],这不仅需要较高的技术要求、较大的实验成本、经过一定训练的技术人员,还要历经较长的实验时间,严重限制了真菌病 PCR检测方法在临床的应用和普及。因此我们以念珠菌属作为突破口,对其破壁—破膜—释放 DNA系列程序的条件及相应的 PCR扩增体系作了反复研究,最终获得了一种简便、快速的 PCR检测方法,现介绍如下。
聚合酶链反应、快速检测、检测方法、基因释放剂、真菌菌株、原生质体形成、缓冲液、异硫氰酸胍、实验时间、实验成本、前期处理、破壁、念珠菌属、临床标本、扩增体系、技术要求、技术人员、抽提过程、病原真菌、真菌病
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R75(皮肤病学与性病学)
第二军医大学校科研和教改项目
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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