shRNA-Survivin基因对A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响

摘要：

目的 构建shRNA-Survivin慢病毒载体,对肺腺癌A549细胞中Survivin基因表达进行干扰,探讨其对肿瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 将A549细胞分成3组,即空白对照组,空白病毒载体对照组和shRNA干扰Survivin慢病毒载体组.采用慢病毒载体构建的方法,采用RT-qPCR和Western-Blot检测凋亡因子Caspase-3和Caspase-9的表达量,采用CCK-8试剂盒检测肺癌细胞的增殖,Transwell小室检测肺癌细胞的迁移,AV-PI凋亡试剂盒检测肺癌细胞的凋亡.结果 ①慢病毒转染效率较高,以肺癌细胞A549为靶点种子细胞,慢病毒转染率为90％;②空白载体病毒组的Caspase-3的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.231±0.112,n=3),shRNA-Survivin组的Caspase-3的mRNA的相对表达量为(0.121±0.009,n=3);两组比较具有统计学差异(t=2.097,P=0.0219＜0.05),Caspase-9的mRNA表达具有相同的趋势;③Caspase-3的蛋白相对表达量为(0.173±0.231,n=3),shRNA-Survivin组与空白载体病毒组相比,具有统计学差异(t=3.221,P=0.0241 ＜0.05);④Transwell实验结果,CCK-8检测结果和AV-PI检测结果显示,空白对照组、空白载体病毒组、shRNA-Survivin组三组之间比较具有明显的统计学差异(P＜0.05).结论 shRNA干扰Survivin可以有效的抑制肺癌细胞的迁移和增殖,并且提高其凋亡率.

关键词：Survivin、肺癌细胞、细胞增殖、细胞迁移、细胞凋亡

所属期刊栏目：11

分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：湖北省教育厅科学研究计划资助项目:D20152104

在线出版日期：2019-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：683-688