牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒三重RT-PCR方法的建立与应用

摘要：

为建立快速同步检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒的多重RT-PCR检测方法并应用于临床检测.根据GenBank中三种病毒参考毒株的基因序列,设计3对特异性引物.利用构建的三种病毒的标准质粒进行三种病毒的三重RT-PCR方法,进行特异性、敏感性和重复性检验,并进行临床样品检测.特异性结果显示,建立的牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法可特异性扩增出阳性标准质粒的基因片段,对牛源沙门氏菌、大肠杆菌、牛巴氏杆菌、牛支原体无扩增;敏感性结果显示,对牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒质粒核酸最低检测浓度分别为250、250和25ng/mL.重复性结果显示,能扩增出一致的目的基因条带.临床样品结果显示,三重RT-PCR方法和单一RT-PCR符合率100％.可见,建立牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,可进行临床检测.

关键词：牛、病毒性腹泻/黏膜病病毒、轮状病毒、冠状病毒、三重RT-PCR

所属期刊栏目：19

分类号：S858.23;R722;TU411.1

资助基金：贵州省农业科学院基础性公益性专项;贵州省农业农村厅贵州省现代肉牛产业技术体系建设项目

在线出版日期：2023-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：96-100