10.3969/j.issn.1001-1528.2021.05.012
附子多糖调控miR-135b-5p对脂多糖诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响
目的 探讨附子多糖对脂多糖(LPS)诱导血管平滑肌细胞增殖和转移的影响及分子机制.方法 将血管平滑肌细胞分为对照组(未经任何处理)、模型组(10 μg/mLLPS)、附子多糖-1、2、3实验组(2.5、5、10 ng/mL附子多糖和10 μg/mL LPS)、阳性对照组(10 μmol/L辛伐他汀和10 μg/mL LPS)、miR-NC组(转染miR-135b-5p阴性对照质粒载体)、miR-135b-5p组(转染miR-135b-5p过表达载体)、附子多糖-3+miR-NC组(转染miR-135b-5p阴性对照质粒载体+10 ng/mL附子多糖+10 μg/mL LPS)、附子多糖-3+miR-135b-5p组(转染miR-135b-5p过表达载体+10 ng/mL附子多糖+10μg/mLLPS).蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki67)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达;流式细胞仪检测细胞周期;细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-135b-5p蛋白表达.结果 LPS可诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移,附子多糖处理后Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,细胞活性降低,迁移细胞数降低,G0/G1期细胞占比升高,S期细胞占比降低(P<0.01),G2/M期细胞占比无统计学差异(P>0.05),miR-135b-5p蛋白表达降低(P<0.01).过表达miR-135b-5p促进LPS诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移.且过表达miR-135b-5p逆转了附子多糖对LPS诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移的抑制作用.结论 附子多糖可通过下调miR-135b-5p抑制脂多糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和转移.
附子多糖、miR-135b-5p、脂多糖、血管平滑肌细胞、增殖、迁移
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R285.5(中药学)
2021-06-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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