苦豆子SaLDC密码子偏好性分析、优化及原核表达

摘要：

目的 研究苦豆子SaLDC密码子偏好性、优化及原核表达.方法 运用EMBOSS在线程序中的CHIPS、CUSP和CodonW软件分析SaLDC密码子的偏好性,根据大肠杆菌密码子的偏好性对SaLDC密码子进行优化,并将优化后的基因命名为optSaLDC;构建重组表达载体pET-28a (+) -optSaLDC,转化大肠杆菌BL21 (DE3);IPTG诱导SaLDC蛋白表达,并对表达蛋白进行质谱分析.结果 SaLDC有28个密码子的RSCU值＞1.00,偏好使用以A/T结尾的密码子;SaLDC的密码子使用偏好性与拟南芥最接近,与大肠杆菌差别最大.优化后的optSaLDC在大肠杆菌中最佳表达条件为IPTG浓度1.0 mmol/L,诱导温度15℃,诱导时间16 h.LC-MS/MS鉴定诱导得到的SaLDC蛋白分子质量为48 990.51 Da.结论 诱导获得的optSaLDC纯化蛋白可用于后续体外SaLDC酶活性分析,为深入研究该基因的功能提供依据.

关键词：苦豆子、赖氨酸脱羧酶基因(SaLDC)、密码子偏好性、密码子优化、原核表达

所属期刊栏目：43

分类号：R282.6(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81760685

在线出版日期：2021-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：429-435