特异性扩增技术鉴定龟甲与鳖甲

摘要：

目的 基于特异性扩增建立动物药龟甲与鳖甲的真伪鉴定技术.方法 根据龟甲与鳖甲及3种常见伪品的全基因组序列的差异设计了5对特异性引物(PCR、PTS、PMS、PPS、PAF),采用SDS法、酚仿抽提法从龟甲与鳖甲中提取与纯化DNA,并通过聚合酶链式反应(PCR)对目标片段进行扩增,产物以琼脂糖凝胶电泳分析及凝胶成像系统检测,并根据电泳条带的有无及分子量大小以鉴定真伪.结果 龟甲与鳖甲及其常见伪品巴西龟、花龟、佛罗里达鳖的DNA经扩增后分别在120、120、81、105、114 bp处产生条带,且引物间无交叉反应,体现出很强的专属性,5个物种DNA的检出限为1 ng.自制药材、饮片、掺伪品均扩增出与目的片段相一致的条带.在市售样品中,18批龟甲和20批鳖甲经鉴定为正品,2批龟甲药材经鉴定为来源于巴西龟的伪品.结论 本文所建立的技术可准确、快速地鉴定龟甲与鳖甲的真伪,有助于监控其产品质量.

关键词：龟甲、鳖甲、掺伪、特异性扩增

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分类号：R284.1(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81773855,81303174;江苏省“六大人才高峰”YY-010;江苏省“青蓝工程”2016;江苏省自然科学基金BK20150463;中国博士后科学基金2017T100338

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2328-2333