精浆硫醇物测定方法的建立及其在高尿酸血症患者精浆中的应用探讨

摘要：

目的:建立一种反相超高效液相色谱-荧光检测法(UPLC-FL)同时测定精浆同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)、半胱氨酰甘氨酸(CysGly)、谷胱甘肽(GSH)的方法,分析高尿酸血症(HUA)患者精浆中4种硫醇物的含量.方法:将精浆样品通过用三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)还原,用三氯乙酸(TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(SBD-F)进行衍生化反应,选用C18色谱柱分离,流动相A为0.025 mol/L磷酸二氢钾KH2PO4(pH 3.0),B为纯甲醇,等度洗脱,在激发波长380 nm、发射波长510 nm的条件下进样.结果:各硫醇物相关系数R2都达到0.999以上,平均回收率在94.23～107.87％间.高尿酸血症组四种硫醇物质含量与正常组相比均有显著性差异(P＜0.05),其中Cys[(108.01±48.03)μmol/Lvs (250.10±55.87) μmol/L]、Hcy[(113.97±6.32)μmol/Lvs (48.35±15.07)μmol/L]、GSH[(3.15±1.48) μmol/Lvs (4.63±1.17) μmol/L]浓度升高,CysGly[(12.79±3.18) μmol/L vs(5.94±0.99) μmol/L]浓度降低.结论:本研究建立的反相超高效液相色谱-荧光检测法首次实现了精浆Hcy、Cys、CysGly、GSH的同时检测,适合于实验室研究和临床常规检测.高尿酸血症患者生殖系统产生明显的氧化损伤.

关键词：UPLC-FL;精浆;高尿酸血症;硫醇物

所属期刊栏目：27

分类号：R698+.2;R394.2(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：河北省重点研发计划项目20377715D

在线出版日期：2021-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：603-608