occludin的RNA干扰慢病毒载体的构建及其在紧密连接中的功能研究

摘要：

目的:体外分析occludin在紧密连接中的作用.方法:构建RNA干扰慢病毒载体,转染TM4细胞后,用RT-PCR和Western blot检测其对occuldin的抑制能力,用体外TJ细胞模型分析occuldin 在 TJ中功能.结果:测序结果表明pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR表达载体已经成功构建;RT-PCR结果显示pLenti 6.3-EGFP-oc-cludin-miR-3能够显著抑制occludin 的表达(P＜0.05);Western 印检测分析发现 pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR-3转染组occuldin的表达值为0.7534±0.089,经ANOVA比较,较空白对照组和pLenti 6.3-EGFP转染组(1.056±0.025)都低,差异显著(P＜0.05).体外细胞TJ模型结果表明pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR-3转染组中,TM4表达的occludin的表达受到抑制,紧密连接的紧密程度下降.结论:pLenti6.3-EGFP-occludin-miR表达载体已经成功构建;occludin是维持紧密连接的功能蛋白之一.

关键词：occludin;RNA干扰;紧密连接

所属期刊栏目：27

分类号：R392.2+6

资助基金：国家自然科学基金81771567

在线出版日期：2021-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：499-505