大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养和生物学特性的研究

摘要：

目的:建立一种分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法,并探讨获得的脂肪干细胞的部分生物学特性.方法:取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞,接种至含10%胎牛血清的DMEM培养液,培养并适时传代,每日在倒置显微镜下观察记录细胞形态和增殖特征,测定其生长曲线,进行冻存复苏实验.第3代细胞使用成骨诱导液诱导其向成骨细胞分化,进行Von Kossa染色;使用成脂诱导液诱导其向成脂细胞分化,进行油红O染色.结果:从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞,其在体外生长增殖迅速,呈成纤维样细胞生长.生长曲线表明第3代脂肪干细胞增殖能力最强,可以在地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠的诱导下,表现出成骨细胞特性,Von Kossa染色出现矿化结节;在.IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)、吲哚美辛、胰岛素的诱导下,表现出脂肪细胞特性,油红O染色后发现胞浆内有脂肪滴.脂肪干细胞在液氮中冻存1个月后,其生长增殖活性和多向分化能力没有明显降低.结论:成功建立了一种简单有效的分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法,获得的脂肪干细胞生长增殖旺盛,具有多向分化能力,可以方便地保存,有望作为细胞治疗和组织工程的种子细胞.在分离大鼠的脂肪干细胞时,NH4Cl裂解红细胞这一步可以省略,地塞米松在成脂诱导过程中不是必需的.

关键词：脂肪干细胞、大鼠、成骨诱导、成脂诱导

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分类号：Q813.1;Q254(生物工程学(生物技术))

资助基金：广东省自然科学基金07001628;广东省科技计划项目2003C34008;广东省卫生厅资助项目B2004034

在线出版日期：2008-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：99-105