10.3969/j.issn.1009-3591.2006.11.008
ATP50荧光表达载体构建及其在TM3小鼠睾丸Leydig细胞定位研究
目的:构建ATP50的荧光表达载体,研究其在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中的表达和在TM3小鼠睾丸Leydig细胞中的定位.方法:原代培养小鼠睾丸Leydig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究ATP50在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达.利用Bam HI和Eco RI酶切位点把ATP50克隆到pEYFP-N1.细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-ATP50在TM3小鼠睾丸Leydig细胞的定位.结果:ATP50表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中.TM3小鼠睾丸Leydig细胞中,绿色荧光的YFP-ATP50和红色荧光的线粒体标记物Mitotracker有完全的共定位.结论:ATP50在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建了ATP50真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-ATP50定位在Leydig细胞的线粒体.这些结果将对老年男性睾丸间质细胞睾酮合成功能障碍的研究提供重要的信息,有利于进一步深入研究.
ATP50、荧光表达蛋白、睾丸、间质细胞、线粒体、小鼠
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Q786;Q492.4(基因工程(遗传工程))
国家211工程项目219
2006-12-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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992-996