流式细胞技术检测胰岛β细胞去分化蛋白表达的研究

摘要：

目的:利用流式细胞技术建立一种检测胰岛β细胞去分化状态的方法。方法:实验研究。常规培养胰岛Min6（小鼠β细胞系）、αTC1-6（小鼠α细胞系）、HepG2（人肝癌细胞）和F9细胞（小鼠畸胎瘤细胞）。白细胞介素1β（IL-1β）合并肿瘤坏死因子α（TNFα）或棕榈酸（PA）过夜处理Min6细胞制备β细胞去分化模型。细胞染色采用抗-嗜铬粒蛋白A（ChgA）、抗-胰岛素（Ins）、抗-胰高血糖素（Gcg）、抗-SRY盒转录因子9（Sox9）和抗-八聚体结合转录因子4（Oct4）抗体进行，流式细胞技术鉴定细胞蛋白表达情况。统计学方法采用独立样本
t检验。
结果:流式细胞实验结果显示Min6细胞高度表达Ins和ChgA，αTC1-6细胞高度表达Gcg，HepG2细胞高度表达Sox9，F9细胞高度表达Oct4，阳性率在90%左右。炎性因子（IL-1β+TNFα）处理Min6细胞导致Ins染色阳性细胞数量明显降低（92.775%±1.702%比97.125%±0.246%，
P=0.045），Sox9染色阳性细胞增加（41.675%±0.390%比25.875%±3.348%，
P=0.003），但ChgA和Oct4染色无明显变化（
P值均>0.05）。PA处理Min6细胞后，Gcg染色阳性细胞数量上升（54.500%±3.597%比41.160%±3.007%，
P=0.022）。实时荧光定量PCR检测mRNA结果与流式细胞仪检测结果的趋势一致。
结论:利用流式细胞技术可检测各去分化模型中不同标志蛋白的表达情况，为判断胰岛β细胞的去分化状态提供了新的手段。

关键词：胰岛素分泌细胞、细胞去分化、流式细胞术、胰岛β细胞

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资助基金：上海市科委科技创新项目19142202300;Science and Technology Innovation Project of Shanghai Science and Technology Committee19142202300

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1318-1323