类风湿关节炎患者血清神经轴突导向分子Semaphorin5A表达及其对破骨细胞分化的影响

摘要：

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A (Sema 5A)表达及其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用.方法 (1)选RA患者62例,骨关节炎(OA)患者30例,健康对照者48例,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测所有受试者血清Sema5A水平.(2)以不同浓度Sema 5A(0、0.5、1、2.5、5μg/ml)处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,培养7d后行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达水平;(3)以5μg/ml Sema 5A处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞7d,培养基中预先加入薄骨片,显微镜下观察骨吸收陷窝个数.结果 (1)RA患者血清Sema 5A水平显著高于健康对照者和OA患者[(5.24±0.59) μg/L比(2.93±0.34)μg/L比(2.68±0.47)μg/L,P＜0.05)];抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体阳性RA患者血清Sema 5A水平显著高于抗CCP抗体阴性者(P＜0.05).Sema 5A水平与RA患者以C反应蛋白计算的28个关节疾病活动度(DAS28-CRP)、C反应蛋白、临床疾病活动指数(CDAI)、Sharp评分呈正相关(r值分别为0.273、0.519、0.448、0.292,P＜0.05);(2)随着Sema 5A浓度增加,TRAP染色阳性细胞数逐渐增多,5μg/ml Sema 5A作用最强.Sema5A能诱导TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9mRNA表达上调;(3)与空白比,5μg/ml Sema 5A骨吸收陷窝数增多.结论 RA患者血清Sema 5A水平显著升高,与患者的疾病活动度及骨破坏程度相关.Sema 5A可直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化.

关键词：关节炎、类风湿、Semaphorin 5A、破骨细胞

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资助基金：浙江省科技厅公益技术研究社会发展项目2015C33177;浙江省医药卫生科技项目科研基金项目2017KY381Zhejiang Provincial Public Technology Applied Research Project2015C33177;Zhejiang Provincial Medical Science and Technology Plan Project2017KY381

在线出版日期：2018-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：661-666