DNA羟甲基化酶基因Tet2激活γ珠蛋白以治疗β地中海贫血的研究

摘要：

目的 为提高诱导γ珠蛋白(γ globin)基因激活的效率,研究DNA羟甲基化酶(DNA双加氧酶)基因Tet2在诱导γ珠蛋白激活表达过程中的作用,为β地中海贫血病的治疗提供理论依据.方法 在人红白血病细胞系K562中用短发夹RSNA(shRNA)干扰的方法下调Tet2表达后,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测干扰后细胞基因组5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)水平的变化,并用亚硫酸盐测序法检测γ珠蛋白上CG位点羟甲基化状态,最后用荧光定量实时PCR检测药物5-氮胞苷诱导γ珠蛋白激活表达量和γ珠蛋白相关转录因子Nfe4和Klf1表达量的变化.结果 不做处理的对照组K562细胞基因组5hmC水平为0.14％,sh-Tet2组(Tet2下调后)约为0.03％;被5-氮胞苷激活后,Tet2下调组(即sh-Tet2+5-氮胞苷组)γ珠蛋白的表达量为未下调组(5-氮胞苷组)的55％左右,但γ珠蛋白上CG位点的羟甲基化状态没有发现明显变化.同时,γ珠蛋白相关转录因子Nfe4和Klf1的表达量变化显著,sh-Tet2组(Tet2下调后)Nfe4为对照组的约20％,Klf1为对照组的3.5倍.结论 Tet2可维持K562基因组5hmC水平,对γ珠蛋白的激活表达起到一定的调控作用,其作用机制有可能通过调控其上游转录因子来间接发挥调节作用,由此推测Tet2是一个潜在的β地中海贫血的治疗靶点.

关键词：Tet2、γ珠蛋白、5羟甲基胞嘧啶、β地中海贫血

所属期刊栏目：57

分类号：R73;Q78;R655.3

在线出版日期：2021-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：206-211