大鼠骨髓间充质干细胞条件培养基对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

摘要：

目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对人HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)的影响,并探讨其分子机制.方法 根据葡萄糖利用情况筛选出最佳造模剂使用浓度及时间;以正常HepG2细胞为空白对照,给予棕榈酸处理的细胞为IR模型组,加入BMSCs-CM为条件培养基(CM)干预组,而加入同样经半透膜浓缩后的低糖培养基作为阴性对照组,分别采用细胞培养、糖原染色、葡萄糖及糖原检测试剂盒等方法来分析各组葡萄糖利用情况;免疫印迹法观察BMSCs-CM对IR HepG2细胞磷酸化的胰岛素受体底物(p-IRS)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)与磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)蛋白表达的影响;分别加入PI3K抑制剂LY294002及激动剂740Y-P后继续观察上述胰岛素信号蛋白的变化情况.结果 (1)以0.25 mmol/L棕榈酸作用HepG2细胞24 h的方法成功建立IR模型;IR模型组培养液中葡萄糖含量明显高于空白对照组,其细胞内糖原含量也显著减少(P＜0.05).(2)与IR模型组相比,CM干预组HepG2/IR葡萄糖的摄取与利用明显改善(P＜0.05),而在阴性对照组则差异没有统计学意义.(3)CM干预组p-IRS、PI3K与p-AKT的蛋白表达水平显著高于IR模型组(P＜0.05);而在加入LY294002阻断PI3K后,给予BMSCs-CM后PI3K及p-AKT蛋白含量则未增加;进一步加入740Y-P过度激活PI3K后,则这些蛋白的表达水平较IR模型组显著升高.结论 大鼠BMSCs-CM的胰岛素增敏作用与p-IRS、PI3K与p-AKT蛋白的表达增强有关.

关键词：间质干细胞、胰岛素抗药性、HepG2细胞

所属期刊栏目：54

分类号：R34;R737.9;R587.1

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）2013AA020105

在线出版日期：2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：439-444