结核分枝杆菌4种新抗原的克隆表达及血清学评价

摘要：

目的 初步评价结核分枝杆菌4种新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c和Rv1547的血清学诊断价值.方法 以结核分枝杆菌实验室标准参照菌株H37Rv全基因组DNA为模板PCR扩增Rv0432、Rv0674、Rv1566c基因的完整序列,Rv1547基因分为两段(Rv1547-1和Rv1547-2)扩增,与PET-32a表达载体构建重组质粒,重组蛋白利用亲和层析的方法进行纯化.待检测血清和BL21 (DE3)菌体蛋白孵育进行预处理.各重组抗原用ELISA对151份待检血清(41份健康组血清和110份细菌学阳性结核患者组血清)进行IgG抗体检测.检测结果用受试者工作特征曲线对其诊断效能进行分析和评价.采用t检验比较目的蛋白在结核患者组和健康组的差异性.结果 成功克隆表达和纯化了蛋白Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2,ELISA结果显示Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数和曲线下面积分别为43.64％～ 92.73％、80.49％～92.68％、0.92 ～ 0.94、0.38 ～0.80、0.363～ 0.732和0.649～ 0.915.目的蛋白在结核组检测到的IgG抗体水平均大于健康组(P＜0.000 1).结论 结核分枝杆菌新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2具有良好的血清学检测价值,可作为结核病免疫学诊断的候选抗原.

关键词：结核分枝杆菌、抗原、免疫学诊断、酶联免疫吸附试验

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在线出版日期：2018-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：514-518