多重半套式聚合酶链反应在检测脑脊液病原菌中的应用

摘要：

目的建立多重半套式聚合酶链反应(PCR)快速检测脑脊液标本中常见的病原菌.方法通过对病原菌16S rRNA基因保守区和变异区的序列分析,设计通用引物及革兰阴性菌、革兰阳性菌的特异性引物,分别作为外、内侧引物,对脑脊液标本中不同细菌的DNA进行多重半套式PCR扩增;同时与常规细菌培养法作比较,并检测了该方法的敏感性.结果外侧扩增后革兰阳性菌、革兰阴性菌经扩增后均有长约1 032 bp的片段产生;内侧扩增两种细菌除1 032 bp的产物外,革兰阳性菌另有一336 bp的特异性产物,革兰阴性菌另有一127 bp的特异性产物.该方法最低可检测出8 cfu/ml 的大肠埃希菌;62份脑脊液标本扩增结果与培养法相比,敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为93.8%、5.7%、88.2%、97.8%.结论多重半套式PCR方法能特异、敏感、快速地检测出脑脊液感染的常见病原菌.

关键词：聚合酶链反应、脑脊液、细菌、16S rRNA 基因

所属期刊栏目：24

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：296-299