MicroRNA-133b对烟草提取物诱导的人小气道上皮细胞间充质转化的影响

摘要：

目的:探讨微小RNA(miR)-133b对烟草提取物(CSE)诱导的人小气道上皮细胞间充质转化的影响及其调控机制。方法:基因表达数据库(GEO数据库)中搜索慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮细胞miR的表达谱芯片，寻找差异表达的miR并用实时荧光定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)验证；小气道上皮细胞(HSAEpiC)根据干预方式不同分为对照组、CSE组、CSE＋miR-133b抑制剂转染组(抑制剂组)，CSE＋miR-133b抑制剂对照转染组(抑制剂对照组)。观察各组细胞形态变化，qRT-PCR法检测各组miR-133b、转化生长因子(TGF)-β1 mRNA、Smad2 mRNA、钙黏附蛋白E(E-cadherin)mRNA与波形蛋白(Vimentin)mRNA，酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫印迹法(Western blot)检测细胞上清液及细胞E-cadherin与Vimentin蛋白水平。结果:在GSE53519发现9个差异表达的miR，验证后发现miR-133b在HSAEpiC细胞模型中表达差异最为显著。CSE诱导HSAEpiC细胞形态改变，miR-133b抑制剂能部分逆转细胞形态变化。CSE诱导HSAEpiC细胞上皮表型标志物E-cadherin mRNA及蛋白表达减少、间质表型标志物Vimentin mRNA及蛋白表达增多(
F＝9.09、12.35、7.57、101.87，
P＝0.015、0.007、0.023、0.000)；miR-133b抑制剂能部分逆转E-cadherin Vimentin mRNA及蛋白表达(
F＝40.59、27.74、15.87、20.42，
P＝0.000、0.001、0.004、0.002)。CSE诱导HSAEpiC细胞TGF-β1 mRNA、Smad mRNA表达增多，miR-133b抑制剂部分逆转TGF-β、mRNA、Smad mRNA的改变(
F＝17.25、64.15，
P＝0.003、0.000)。
结论:miR-133b可能通过TGF-β/Smad通路调控CSE诱导的HSAEpiC细胞上皮间充质转化。

关键词：肺疾病，慢性阻塞性、烟草、上皮细胞

所属期刊栏目：39

资助基金：福建省卫生厅中青年骨干人才培养项目2017-ZQN-43;Medical Elite Cultivation Program of Fujian in China2017-ZQN-43

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：336-340