10.3760/cma.j.issn.0254-9026.2020.03.019
氯化锂通过上调焦磷酸水平抑制血管平滑肌细胞钙化
目的:探讨氯化锂对血管平滑肌细胞钙化的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人主动脉血管平滑肌细胞,用钙化培养基(无机磷浓度为3 mmol/L)建立平滑肌细胞钙化模型。药物处理组用氯化锂(10 mmol/L)预处理细胞4 h后加入3 mmol/L的无机磷,继续培养细胞数天后用茜素红染色检测细胞钙盐沉积水平,同时应用焦磷酸偶联酶反应底物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)消耗法,酶标仪(OD340)检测细胞外焦磷酸的分泌;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测细胞中
ankh基因的表达;采用慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞的方法,建立对照细胞组和
ankh敲低的实验细胞组,并观察其对细胞钙化的影响。
结果:高磷细胞组钙化检测值为(65.00±2.11)ng/g,较对照细胞组(12.39±0.38)ng/g钙化水平明显升高(
P<0.01)。氯化锂预处理细胞的钙化检测值为(24.92±1.87)ng/g,与高磷对照组(60.94±4.51)ng/g比较能显著抑制高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化(
P<0.01);氯化锂预处理明显上调细胞外液中焦磷酸的含量,基础条件下预处理组为(51.70±7.26)×10
-3 mmol/g,对照组为(28.71±2.55)×10
-3mmol/g(
P<0.01);高磷刺激下预处理组为(34.35±4.27)×10
-3mmol/g,对照组为(20.89±4.93)×10
-3mmol/g(
P<0.05),同时氯化锂预处理显著升高细胞
ankh表达水平(
P<0.01);而敲低
ankh使无机磷诱导的血管平滑肌细胞钙化程度显著加重,敲低
ankh细胞钙化检测值为(71.73±2.45)ng/g,对照组为(56.19±3.59)ng/g(
P<0.01)。
结论:氯化锂通过上调平滑肌
ANKH的表达,升高细胞外液中的焦磷酸水平,抑制高磷诱导下血管平滑肌细胞的钙化。
肌,平滑,血管、氯化锂、二磷酸盐类、钙化
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国家自然科学基金81270854、30900627;北京医院科技新星项目BJ-2016-032;National Natural Science Foundation of China81270854, 30900627;Beijing Hospital Nova ProjectsBJ-2016-032
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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