10.3760/j:issn:0254-9026.2007.02.011
人骨髓间充质干细胞体外心肌样细胞诱导分化中细胞周期与凋亡的分析
目的 探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向心肌样细胞分化过程中分化与凋亡的情况,为hMSCs临床移植治疗提供数据.方法 采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs,分3组在体外分别经0μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L 5-杂氮胞苷(5-Aza)诱导24 h后继续培养8周,相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡指数,应用RT-PCR技术分析肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白T(cTNT)、凋亡相关基因(Bcl-2、Bax)的mRNA在分化过程中的动态表达.结果 hMSCs诱导后凋亡指数随诱导后培养时间增加,低浓度诱导组低于标准浓度诱导组,组间差异有统计学意义(P<0.05),G0/G1期细胞比例诱导后较对照组显著减少(P<0.05);β-MHC和CTNT在诱导后表达开始增强,在第6周时均达到高峰,第8周时表达开始衰减,Bcl-2、Bax基因表达呈时间依赖性变化.结论 hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性,但诱导过程中hMSCs发生细胞凋亡,采用2.5 μmol/L 5-Aza低浓度诱导可减少细胞凋亡发生.
间质干细胞、诱导、肌细胞、心脏、细胞凋亡
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R3(基础医学)
安徽省自然科学基金0743771
2008-03-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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