miR-150靶向β-catenin调控人牙周膜干细胞成骨分化能力的机制研究

摘要：

目的 体外研究 miR-150 对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化能力的调控作用及其分子机制.方法 分离培养hPDLSCs并进行成骨向分化诱导,q-PCR检测miR-150及成骨相关基因(RUNX2、OCN、OPN、ALP)的表达;hPDLSCs中转染miR-150沉默(inhibitor)及过表达模拟物(mimics),q-PCR检测miR-150和β-catenin的表达,茜素红染色实验检测hPDLSCs成骨分化能力的变化;qPCR及Western blot检测沉默及过表达miR-150后β-catenin表达水平的变化;双荧光素酶报告基因实验验证miR-150的潜在靶基因;在hPDLSCs中过表达miR-150并加入SKL2001(Wnt/β-catenin通路激动剂),检测β-catenin表达及hPDLSCs成骨分化能力的变化.结果 RUNX2、OCN、OPN、ALP基因在hPDLSCs成骨向分化诱导后表达明显上调,而miR-150的表达则显著下调;q-PCR及茜素红染色结果显示抑制miR-150可明显上调成骨相关基因的表达并促进hPDLSCs成骨向分化,而过表达miR-150则结果相反;生物信息学分析显示β-catenin为miR-150的潜在靶基因,双荧光素酶报告进一步验证β-catenin为miR-150的靶基因;而SKL2001激活β-catenin后可逆转miR-150 mimics对hPDLSCs成骨分化的抑制作用.结论 miR-150可靶向β-catenin调控hPDLSCs的成骨向分化能力,提示miR-150在牙周组织工程损伤修复中发挥重要作用.

关键词：miR-150、人牙周膜干细胞(hPDLSCs)、β-catenin、成骨分化

所属期刊栏目：21

分类号：R780.2(口腔科学)

资助基金：河南省科技攻关项目222102310681

在线出版日期：2023-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：142-147,162