10.19749/j.cn.cjgd.1672-2973.2019.05.005
PELP1激活Ras-Raf-MEK-ERK信号通路调控牙周膜干细胞成骨分化
目的:探讨Ras-Raf-MEK-ERK信号通路在PELP1调控牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨分化过程中的变化.方法:通过单克隆法获得人源的牙周膜干细胞,分别将PEPL1过表达质粒pIRES2-EGFP-PELP1、PELP1 siRNA转染至牙周膜干细胞胞内48h后,收集细胞,分别提取细胞的总RNA和总蛋白,运用qRT-PCR的方法检测胞内PELP1以及成骨相关指标Runx2、ALP和OCN的基因水平变化,运用western blot的方法检测Ras、p-c-Raf、c-Raf、p-MEK、MEK、p-ERK、ERK蛋白水平的变化.结果:与转染空载的对照组相比,转入PELP1过表达质粒的牙周膜干细胞胞内PELP1基因的表达量为对照组的3202倍,成骨相关基因Runx2、ALP和OCN的表达分别上调4.69、2.27和2.28倍,其差异具有统计学差异(P<0.01).同样,与对照组相比,转入PELP1 siRNA后,牙周膜干细胞胞内PELP1的基因表达水平为对照组的0.33倍,成骨相关基因Runx2、ALP和OCN的表达量分分别为对照组的0.24、0.44和0.57倍,其差异具有显著统计学差异(P<0.01).蛋白印迹的结果显示,当牙周膜干细胞胞内PELP1基因过表达时,Ras表达水平升高的同时,Raf、MEK以及ERK被激活.抑制牙周膜干细胞胞内PELP1基因的表达时,Ras表达水平下降的同时Raf、MEK以及ERK被抑制.结论:PELP1激活Ras-Raf-MEK-ERK信号通路调控牙周膜干细胞成骨分化.
PELP1、牙周膜干细胞、Ras-Raf-MEK-ERK信号通路、成骨分化
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R781.4(口腔科学)
2019-11-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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