内质网应激PERK途径在高糖诱导血管平滑肌细胞向成骨样细胞转化中的作用
目的：研究高糖刺激SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）向成骨样细胞转分化中内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）途径的作用。方法原代培养VSMCs，分为正常对照组（5mmol/L D-葡萄糖），甘露醇组（5mmol/L D-葡萄糖+25mmol/L甘露醇），高糖组（30mmol/L D-葡萄糖），高糖+PERK-小干扰RNA（siRNA）转染组（30mmol/L D-葡萄糖+PERK-siRNA转染），高糖+RNA干扰阴性对照组（30mmol/L D-葡萄糖+乱序RNA转染）。分别作用48和72h。逆转录-聚合酶链反应及Western blot分别从信使RNA（mRNA）和蛋白质水平检测不同时间点内质网应激相关分子GRP78、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α、ATF4的改变，以及成骨样细胞标志性分子核心转录因子（Cbfα-1）、骨钙素以及平滑肌细胞标志性分子α-SMA的改变情况。应用碱性磷酸酶（ALP）活性检测试剂盒检测ALP的活性。结果与正常对照组和甘露醇组比较，在mRNA水平，高糖组和高糖+RNA干扰阴性对照组PERK和eIF2α表达升高（P＜0.05），PERK-siRNA转染后其表达水平均降低（P＜0.05），在蛋白质水平，PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α表达升高（P＜0.05），PERK-siRNA干预后其表达均降低（P＜0.05）。高糖刺激VSMCs后ALP活性升高（P＜0.05），PERK-siRNA转染后其表达均降低（P＜0.05）。结论内质网应激PERK途径在高糖诱导VSMCs由收缩表型向成骨样细胞表型转化中发挥作用，抑制PERK途径可以部分阻止这一转化过程。
蛋白激酶R样内质网激酶、高糖、肌细胞、平滑肌、成骨样细胞、转化
R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
2014-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
282-290
