二氧化硅诱导小鼠肺上皮细胞中miR-204靶向调控DVL3基因的作用

摘要：

目的:构建小鼠miR-204过表达重组慢病毒载体，并在二氧化硅（SiO
2）诱导的小鼠肺上皮细胞（MLE-12细胞）中验证miR-204与DVL3的靶向调控作用。
方法:于2019年10月，从小鼠基因组中应用聚合酶链式反应（PCR）法扩增出pre-miR-204基因，测序后将扩增产物克隆到pLenti-CMV-EGFP慢病毒载体，通过PCR筛选及测序对阳性克隆进行鉴定。将miR-204过表达慢病毒载体转染至293T细胞，进行慢病毒的包装和滴度测定，研究分为SiO
2对照组、病毒对照组及miR-204病毒组，实时荧光PCR检测miR-204和DVL3基因的表达。
结果:构建miR-204慢病毒表达载体Lv-miR-204-5p经PCR和测序鉴定正确，并获得滴度为9.57×10
8 IU/ml的病毒稀释液；实时荧光PCR检测结果显示，miR-204病毒组MLE-12细胞中miR-204基因的表达高于SiO
2对照组和病毒对照组，DVL3基因的表达低于SiO
2对照组和病毒对照组，差异均有统计学意义（
P<0.05）。
结论:miR-204过表达慢病毒载体可能在SiO
2诱导的MLE-12细胞中抑制DVL3基因的表达。

关键词：二氧化硅、miR-204、慢病毒、载体构建、小鼠

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资助基金：中国疾病预防控制中心化学污染与健康安全重点实验室开放基金2021CDCKL01;天津市津门医学英才人才项目2018;天津市医学重点学科（专科）建设项目资助2021;Chemical Pollution and Health Safety Key Laboratory Open Fund by Chinese Center for Disease Control and Prevention2021CDCKL01;Tianjin Jinmen Medical Talents Program2018;Tianjin Key Medical Discipline Specialty Construction Project2021

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：328-332