K-ras基因沉默对PM 2.5染毒HBE细胞癌基因表达的影响

摘要：

目的:探讨
K-ras基因对PM
2.5染毒人支气管上皮（HBE）细胞部分癌基因和抑癌基因表达的影响。
方法:于2019年9月，根据
K-ras基因mRNA序列，设计合成干扰序列，转染HBE细胞构建
K-ras基因沉默细胞。用10、50 μg/ml PM
2.5混悬液及10 μmol/L Cr
6+分别染毒HBE细胞和
K-ras基因沉默细胞，实时荧光定量PCR检测
c-myc、
c-fos、
N-ras、
cyclin-D1、
p16、
p53基因的mRNA表达水平，Western blot检测c-myc和p53蛋白表达水平。
结果:K-ras基因沉默细胞中
K-ras基因mRNA表达水平下降（80.5%±3.6%），K-ras蛋白表达水平下降（58.9%±4.7%）（
P<0.01）。各浓度PM
2.5染毒HBE细胞组、
K-ras沉默细胞组及10 μmol/L Cr
6+染毒HBE细胞组、
K-ras沉默细胞组
c-myc、
c-fos、
N-ras、
cyclin-D1基因mRNA表达水平均高于未染毒相应细胞对照组，
p16和
p53基因mRNA表达水平低于未染毒相应细胞对照组（
P<0.01）；10 μg/ml PM
2.5染毒
K-ras沉默细胞组
c-myc、
c-fos、
p16基因mRNA表达水平低于10 μg/ml PM
2.5染毒HBE细胞组，
p53基因mRNA表达水平高于10 μg/ml PM
2.5染毒HBE细胞组（
P<0.01）；50 μg/ml PM
2.5染毒
K-ras沉默细胞组
c-fos、
N-ras、
cyclin-D1、
p16和
p53基因mRNA表达水平均低于50 μg/ml PM
2.5染毒HBE细胞组（
P<0.01）。50 μg/ml PM
2.5染毒HBE细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒HBE细胞组，p53蛋白表达水平低于未染毒HBE细胞组（
P<0.05）；50 μg/ml PM
2.5染毒
K-ras沉默细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒
K-ras沉默细胞组（
P<0.05）。
结论:PM
2.5可引起HBE细胞癌基因表达升高，
K-ras基因沉默能抑制PM
2.5诱导HBE细胞癌基因的表达。

关键词：基因沉默、K-ras、细颗粒物、人支气管上皮细胞、癌基因

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资助基金：深圳市科技研发基础研究项目JCYJ20190807102205480;深圳市医疗卫生三名工程SZSM201611068;深圳市医学重点学科建设经费SZXK067;Shenzhen Science and Technology ProjectJCYJ20190807102205480;Sanming Project of Medicine in ShenzhenSZSM201611068;Shenzhen Key Medical Discipline Construction FundSZXK067

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：825-830