p38MAPK基因沉默对PM 2.5染毒肝细胞后癌基因和凋亡基因表达的影响

摘要：

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）基因沉默对大气细颗粒物（PM
2.5）染毒肝细胞（L02细胞）相关基因表达的影响。
方法:于2019年6至9月，根据GenBank提供的p38MAPK基因序列，设计合成3条干扰序列，退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中，将重组慢病毒载体转染L02细胞。用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting）法对p38MAPK基因沉默效果进行鉴定。用浓度为50 μg/ml的PM
2.5水溶物和10 μmol/L阳性对照Cr
6+分别染毒L02细胞、p38MAPK基因沉默细胞24 h，同时设立空白对照组。用荧光定量PCR检测癌基因（c-fos、c-myc、k-ras）、抑癌基因（p53）和凋亡基因（Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9）的相对表达水平。
结果:p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK基因和蛋白表达水平较正常L02细胞明显下降（
P<0.05），p38MAPK基因沉默细胞株构建成功。与空白对照组比较，PM
2.5染毒L02细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平升高，抑癌基因p53表达水平下降，差异均有统计学意义（
P<0.05）；与PM
2.5染毒L02细胞组比较，PM
2.5染毒p38MAPK基因沉默细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平下降，抑癌基因p53表达水平升高，差异均有统计学意义（
P<0.05）。
结论:PM
2.5对L02细胞癌基因、抑癌基因和凋亡基因表达有明显影响，而p38MAPK基因沉默可抑制PM
2.5对L02细胞的影响。

关键词：肝细胞、基因沉默、细颗粒物、雾霾、凋亡基因、癌基因

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资助基金：深圳市科技研发基础研究项目JCYJ20170413101713324;Shenzhen Science and Technology Basic Research ProjectJCYJ20170413101713324

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：721-725