溶酶体在锰致SK-N-SH细胞毒性中的作用

摘要：

目的 探讨溶酶体在锰致人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞毒性中的作用.方法 以浓度分别为0、0.062 5、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L MnCl2处理SK-N-SH细胞24 h,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞存活率.以0、0.125、0.25、0.5和1.0 mmol/L MnCl2处理细胞24 h,激光共聚焦显微镜观察红色荧光探针标记的溶酶体,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测溶酶体膜相关蛋白1(LAMP1)、组织蛋白酶D(CTSD)表达水平,CTSD活力荧光测定试剂盒检测CTSD活力.结果 与对照组比较,0.5~4.0 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞存活率明显降低,0.5~1.0 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞相对荧光强度明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01);与对照组比较, 0.125~0.5 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞LAMP1蛋白表达水平明显增加,0.125、0.25 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞成熟型CTSD(m-CTSD)蛋白表达水平明显增加,1.0 mmol/L MnCl2处理组m-CTSD蛋白明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,各MnCl2处理组CTSD活力差异均无统计学意义(P>0.05).结论 MnCl2可引起SK-N-SH细胞毒性,溶酶体在锰低剂量时发挥正常功能,但在锰高剂量时受损.溶酶体作为自噬下游发挥降解功能的细胞器,可能参与了锰的神经毒性机制.

关键词：锰、神经母细胞瘤细胞、溶酶体、溶酶体膜相关蛋白1、组织蛋白酶D

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资助基金：北京市自然科学基金7152084、7192099 Fund program: Beijing Natural Science Foundation7152084,7192099

在线出版日期：2019-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：332-336