百草枯对人胚胎神经祖细胞自噬作用的影响

摘要：

目的 通过观察百草枯(PQ)染毒后人胚胎神经祖细胞超微结构变化以及自噬相关基因表达情况,探讨PQ对人胚胎神经祖细胞自噬作用的影响.方法 以永生化的人胚胎神经干细胞系(ReNcell CX细胞)为研究对象,设立1.00、10.00、100.00 μmol/L PQ染毒组和对照组(0.00 μmol/L),采用CCK8法测定PQ染毒对ReNcell细胞活力的影响,透射电镜观察细胞超微结构变化;实时荧光定量-聚合酶链反应技术检测自噬相关基因mTOR、Beclin1、Atg5、Atg7 、LC3、Atg12的mRNA表达情况以及凋亡相关基因Bc-2和Bax的mRNA表达情况.结果 与对照组比较,100.00 μmol/L染毒组人胚胎神经干细胞活力明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).1.00 μmol/L染毒组可观察到自噬小体,但无细胞凋亡改变,而10.00 μmoFL染毒组可同时可观察到自噬小体和细胞凋亡改变.自噬作用正向调节基因LC3、Atg12、Atg5、beclin1、Atg7 mRNA表达水平随PQ浓度的增加,呈现先增加后降低的趋势.1.00 μmol/L染毒组beclin1 mRNA表达水平达到峰值;10.00 μmol/L染毒组LC3、Atg12、Atg5 、Atg7mRNA表达水平达到峰值.而自噬作用负调节基因mTOR mRNA表达水平随PQ浓度的增加呈现先下降后上升的趋势,与对照组比较1.00 μmol/L染毒组mTOR mRNA表达水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);100.00μmol/Ll染毒组mTOR mRNA表达水平明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,10.00μmol/L染毒组促凋亡基因Bax mRNA表达水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01),100.00 μmo1/L染毒组Bax mRNA表达水平明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).1.00、10.00、100.00μmol/Ll染毒组抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平均明显低于对照组,但在10.00 μmol/L染毒组Bcl-2 mRNA表达水平最低,差异有统计学意(P＜0.01).结论 在PQ染毒浓度较低时激活了自噬作用,自噬作用发挥神经保护的作用;PQ染毒浓度较高时,自噬作用被抑制并诱导细胞凋亡增加.

关键词：百草枯、神经元、干细胞、自噬作用

所属期刊栏目：34

分类号：R737.9;S852.659.1;R329.1

资助基金：国家自然科学基金81472996

在线出版日期：2016-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：178-183