10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2012.04.008
不同剂量米非司酮诱导Nrf2基因表达对百草枯致A549细胞损伤的影响
目的 观察不同剂量米非司酮(RU486)诱导Nrf2基因表达对百草枯(PQ)致A549细胞毒性影响.方法 Ad-RUNff2感染的A549细胞,在给予10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L的RU486诱导表达6h后,加入浓度为10-3 mol/L的PQ培养48 h,用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)法和凝胶迁移率试验( EMSA)检测不同浓度RU486诱导的Nrf2表达情况;Real-timePCR、ELISA检测不同浓度Nrf2对PQ致A549细胞损伤炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α,凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶( Caspase )-3、Caspase-9、细胞色素c(Cyt C)基因相对表达量和蛋白含量的影响.用化学比色法检测氧化因子过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)蛋白含量.结果 Nrf2基因相对表达量及蛋白表达均随RU486浓度增高而增高,其中以RU486浓度为10-7 mol/L时最高,与PQ中毒组及空白对照组的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05).随RU486浓度降低,IL-6、TNF-α的基因相对表达量及蛋白含量升高,在RU486 10-7 mol/L时最低,与PQ中毒组及空白对照组的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);IL-10的变化则相反.随RU486浓度降低,Caspase-3、Caspase-9、Cyt C基因相对表达量升高,10-7 mol/L时最低,与PQ中毒组及空白对照组的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05).随着RU486浓度的增高,CAT 蛋白含量增高,RU486浓度为10-7 mol/L时含量最高,与PQ中毒组及空白对照组的差异有统计学意义(P<0.05),MDA含量的变化则相反.结论 RU486诱导Nrf2基因表达能促进A549细胞的氧化-抗氧化系统平衡,并抑制炎症因子、凋亡因子,对PQ致A549细胞损伤有保护作用.
百草枯、米非司酮、白细胞介素类、肿瘤坏死因子、过氧化氢酶
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R9(药学)
浙江省自然科学基金项目Y2080977;浙江省医学创新学科建设计划资助11-CX26
2012-07-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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