1,4-苯醌暴露下小鼠骨髓细胞p15基因表达和甲基化状态

摘要：

目的 探讨1,4-苯醌(1,4-BQ)暴露下,体外原代培养的小鼠骨髓细胞中抑癌基因p15的mRNA表达及启动子区的甲基化状态.方法 体外分离小鼠骨髓细胞,测定0、0.1、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L的1,4-BQ对小鼠骨髓细胞活力的影响,最终确定以0、0.1、1.0、10.0 μmol/L的1,4-BQ染毒骨髓细胞24 h;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测p15基因mRNA的表达变化;重亚硫酸盐测序法(BSP)检测启动子区域CpG岛的甲基化状态.结果 1,4-BQ对小鼠骨髓细胞具有剂量依赖的毒性作用,其LC50为8.3 μmol/L(95%CI:4.6～10.6 μmol/L).与对照组(100.0%)比较,10.0、20.0、40.0μmol/L 1,4-BQ染毒组小鼠的骨髓细胞生存率(35.9%、35.8%、30.5%)均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).10.0μmol/L染毒组p15 mRNA表达为对照组的43%,与对照组比较,1.0和10.0 μmol/L染毒组p15基因mRNA表达量明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).BSP测序结果显示,染毒组和对照组相同,p15基因启动子区域CpG岛上56个甲基化位点仍保持非甲基化状态.结论 1,4-BQ暴露可导致原代培养的小鼠骨髓细胞中p15基因的mRNA表达量下降,但启动子区域CpG岛的甲基化状态未受影响,提示甲基化不参与1,4-BQ介导的p15基因表达下调.

关键词：苯酯类、DNA甲基化、基因表达

所属期刊栏目：29

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金项目30972510;温州市科技局项目Y20090104

在线出版日期：2011-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：28-32