系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p表达及调控机制

摘要：

目的 探究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p的表达及对PI3K/Akt/mTOR信号通路调控机制.方法 选取本院就诊的SLE患者50例,包括缓解期患者20例(缓解期组)、 活动期患者30例(活动期组),同时选择25例健康志愿者作为对照组.采用RT-PCR检测入选者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p表达情况;应用Pearson相关性分析方法了解miRNA-199a-3p表达水平与SLE疾病活动程度,并进一步分析miRNA-199a-3p表达水平与脏器受累的相关性;利用流式细胞仪检测miRNA-199a-3p对细胞凋亡的影响.通过生物信息软件和荧光素酶报告实验验证miRNA-199a-3p的靶基因.上调miRNA-199a-3p后采用Western Blot检测PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况.结果 缓解期SLE患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p相对表达水平(1.25±0.19)显著低于健康志愿者(2.38±0.24),但显著高于活动期患者(0.34±0.07)(P<0.05).Pearson相关性分析表明miRNA-199a-3p相对表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动度指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)评分呈负相关性(R=-0.704,P<0.05),浆膜炎、 血尿、 血管炎、 脱发和光过敏患者miRNA-199a-3p水平与无以上临床表现患者相近(P>0.05);皮疹、 白细胞降低和肾炎患者miRNA-199a-3p水平显著高于无以上临床表现患者(P<0.05).凋亡检测发现上调miRNA-199a-3p能够显著提高单个核细胞凋亡率(P<0.05).生物信息学及荧光素酶报告实验表明miRNA-199a-3p的靶基因为mTOR mRNA 3′UTR.WB检测表明外周血单个核细胞转染miRNA-199a-3p mimics后,能够显著下调mTOR、PI3K、pAKt和Bcl-2表达水平(P<0.05),同时能够显著上调Bax与caspase-3表达水平(P<0.05).结论 SLE患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p低表达,且其能够影响PI3K/Akt/mTOR信号通路分子的表达.

关键词：miRNA-199a-3p、系统性红斑狼疮、外周血单个核细胞、调控机制、mTOR

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资助基金：宁波市鄞州区科技计划项目 鄞科2014-57号

在线出版日期：2019-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：623-629